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KingFisher核酸提取試劑盒的使用建議

發(fā)布日期: 2017-01-11
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    KingFisher核酸提取試劑盒用于細(xì)菌基因組DNA的小量提取。其純化原理是利用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞釋放基因組DNA,由硅膠膜柱可逆吸附基因組DNA,經(jīng)蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)后,用純化液洗脫獲得基因組DNA。本產(chǎn)品可從0.5-2 ml對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌液中提取到3-20μg 超純基因組DNA,此基因組DNA可直接用于酶切、PCR等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
    1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
    2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
    3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
    4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6. 底物請(qǐng)避光保存。
    7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
    8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 
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